测定生物样品中埃坡霉素含量的LC/MSn分析方法
                窦桂芳，孙文种，朱晓霞，甘惠，吴卓娜，孟志云 
          军事医学科学院野战输血研究所药物代谢研究室，北京 100850

摘要
    埃坡霉素是拟申报创新药物的抗生素类化合物，实验显示具有广谱抗增殖的活性，药效学研究表明荷瘤裸鼠尾静脉缓慢推注给药，有显著的抑瘤作用。临床给药方案拟定为每周给药一次，连续3周，休息1周，4周为一个疗程，静脉滴注。为了解该药的药代动力学特征，特建立了生物样品中埃坡霉素的定量方法。
    采用对埃坡霉素灵敏度高的液质联用（LC-MSn）方法测定生物样品中埃坡霉素的浓度，TSQ Quantum ultra 质谱仪，电喷雾离子化（ESI），正离子方式检测。样品前处理方法为，100 L生物样品（血浆、粪、尿、胆汁、组织）中加入10 L内标溶液（500ng•mL-1），再加入500 L叔丁基甲醚，涡流混合1 min，1.4×104 rpm离心3 min后取上清液300 L于25℃氮气流下吹干，残留物于100 L溶液（甲醇：乙腈/50：50）溶解，20 L进样。
    埃坡霉素的血浆浓度在1.0 ng•mL-1～1000 ng•mL-1范围内线性关系良好，相关系数在0.9904～0.9989之间，最低定量浓度为1.0 ng•mL-1；分析方法的准确度用相对偏差表示，即测得值的均值与理论值之间的百分偏差，本试验中，测定埃坡霉素（浓度分别为3，75和750 ng•mL-1）的相对偏差为-9.8%~3.5%；用单因素方差分析法计算分析方法的日内和日间精密度。结果表明，埃坡霉素的日内和日间精密度为4.2%~11.5%；样品稀释100倍后，浓度偏差在6.5％之内，不会对埃坡霉素样品的测定造成影响；血浆中基质对埃坡霉素和内标有一定的离子抑制效应，影响均在9.0％之内，不影响对血浆中药物埃坡霉素的含量测定。
    建立的分析方法专属性强，灵敏度、精密度、准确度均能满足埃坡霉素的药代动力学研究。