两种色谱法测定塑料输液器材及葡萄糖液中的邻苯二甲酸酯
汪瑗 万金伟 张殿利
首都师范大学化学系 北京 100037

摘要:建立了薄层扫描和气相色谱测定塑料输液器材及葡萄糖液中邻苯二甲酸酯类化合物：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP) 、邻苯二甲酸二正辛酯(DOP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)）的方法。样品用环己烷浸泡，超声提取，进行薄层和气相测定。气相方法回收率为88.85%～120.19 % , 精密度RSD为1.6%～3.2% , 检出限 DMP、DEP、DBP、DOP 和DEHP分别为2.0ng、1.8ng、2.6 ng、3.2ng和3.1ng,两种方法相同处样品用量少,分离效果好。区别在于前者样品前处理简单、费用低，后者回收率高。
关键词:薄层色谱；气相色谱; 输液器材； 葡萄糖液；邻苯二甲酸酯

     邻苯二甲酸酯(Phthalic Acid Esters,PAEs)类物质也称酞酸酯，是一类环境激素，影响生物体内分泌、甚至导致突变、致畸和癌细胞增殖。可通过呼吸、饮食和皮肤接触进入人体内，对人体健康造成危害。
     PAEs主要用作塑料增塑剂, 广泛应用于各类塑料制品，也应用于医疗器材中。由于PAEs与塑料基质之间没有形成化学共价键,而是以氢键和范德华力连接,接触到合适的有机溶剂便会溶解出来。商品化使用的邻苯二甲酸酯约有14种,其中6种被美国环保局（EPA）列入129种重点控制的污染物名单中,分别是DMP、DEP、DBP、DEHP、DOP和BBP； 8种被列在世界野生动物基金会(WWF)的环境激素名单中。我国也将PAEs中的DMP、DBP 和DOP 列入优先控制污染物黑名单。
     塑料医疗器材中，输液管、输液用塑料袋装葡萄糖液中是否含PAEs，含量与种类的确认对医药安全有重要意义。本文应用气相色谱和薄层扫描测定PAEs（邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DOP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)）的两种方法,方法用于塑料输液管、输液袋及内装葡萄糖液中PAEs的测定,加标回收率和样品测定结果满意。
1实验部分
1.1仪器和试剂
     Agilent 6890N 气相色谱仪，CX－250型超声波清洗机、DENSITOMETER CD 60高效薄层扫描仪（德国）、微量进样器（上海医用激光仪器厂）、硅胶G板(青岛海洋化工厂)。
     邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二正辛酯(DOP)和邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)由北京市理化分析测试中心及国家环保总局提供。 异辛烷、乙酸乙酯、无水乙醚、正己烷、甲醇、乙醇均为AR级。
1．2 标准溶液的配制
     准确称取DMP、DEP、DBP、DOP和DEHP标准品各0.1000g，分别用甲醇稀释定容10mL，配制成10000mg/L的单标储备液。分别移取上述5种单标储备液各1mL,用甲醇定容10mL,配制成1000mg/L的混合标准储备液。上述溶液再用甲醇逐级稀释为500mg/L和50mg/L备用。
1. 3样品处理
     固体样品前处理：称取样品10g，切细，放入50mL具塞锥形瓶中，加入10 mL环己烷提取，超声3次，每次10mins，放置10mins，转出清液测定。
液体样品前处理：(1)用液体样品直接用于试验；(2)将液体样品萃取后用于试验：用移液管量5mL葡萄糖溶液于分液漏斗，再加入同体积的环己烷剧烈震动并不时放气，静置使溶液分层，取上层清液进行测定。
1．4 分离测定
1．4.1薄层分析
    吸取一定量标准品混合液和样品提取液,点于同一块硅胶G薄层板上,在色谱缸内以混合溶剂乙酸乙酯-无水乙醚-异辛烷（体积比1：4：15）为展开剂，先饱和30min，然后直立上行展开90mm,取出晾干。将薄层板置于薄层扫描仪工作台上，在测定波长270nm、参比波长330nm的条件下进行双波长反射吸收飞点扫描测定。根据标品中DMP、DEP、DBP、DOP和DEHP的斑点Rf值定性,外标法定量。
1．4.2 GC 分析
    载气:N2；流量:0.8 ml/min；色谱柱:HP-5MS毛细管柱(30.0m×320um×0.25um)；进样方式:手动、不分流；进样量:1-5μl；进样口温度:250℃；检测器：FID，300℃；柱压6.07psi（恒压）；升温程序:150℃(3min)、(15℃/min)→300℃(4min)。根据色谱图中标品保留时间定性,峰面积积分后对照标准曲线定量。
2 结果与讨论
2.1 薄层分离条件的优化
    采用标液薄层斑点原位反射吸收光谱扫描，PAEs在230和275nm处有紫外吸收, 但是在230nm处的背景较高,所以采用270nm和330nm为薄层测定波长和参比波长。
    邻苯二甲酸酯类为弱极性物质,所以以乙酸乙酯为基体，加入其他试剂,调节溶剂极性，逐步优化展开剂，最后选择混合溶剂乙酸乙酯-无水乙醚-异辛烷（体积比1：4：15）为展开剂，25分钟内可较好的分离五种邻苯二甲酸酯类化合物，见图1。

2.2.1线性范围和检测限
    在上述优化条件下，以峰面积积分值为纵坐标,标准品的点样量为横坐标,绘制标准曲线,其回归方程、相关系数、线性范围和最低检出限见表1。
2.1.2 稳定性和精密度试验
    点样展开后，每隔半小时扫描1次,结果表明斑点在3h内稳定，RSD(n=6)为2.0～4.0%。同板精密度RSD(n=6)为2.8～4.4%, 异板精密度RSD(n=4)为3.0～6.8%.
2.2 GC分离
    混合标准溶液色谱分离见图1（1-DMP、2-DEP、3-DBP、4-DEHP、5-DOP）。各物质回归方程、相关系数、线性范围和最低检出限见表1;重复测定混合标准溶液6次检验方法的精密度,DMP、DEP、DBP、DOP和DEHP的相对偏差RSD%分别为1.6、2.7、2.4、3.2和2.9。

3 加标回收和样品测定
    以环己烷作为样品溶剂，分别对试样测定和加标回收试验, 薄层扫描和气相色谱测定塑料输液管、输液袋、袋中葡萄糖液中PEAs。样品检出DEHP，输液管含量为8.4%, 输液袋中含量为3.6%，葡萄糖液含量1.5%，远远超过了欧盟（1999/815/EC指令）对塑料玩具中PAEs总量的规定(0.1%)。用外标法计算各类PEAs回收率，薄层扫描回收率在78.5-95.4%，气相色谱回收率在88.85%～120.19 %范围。
4 结论
    由气相色谱和薄层扫描分析结果比较，两者结果较接近。两种方法样品用量均少,且分离效果好。区别在于前者回收率高，后者样品前处理简单，分析时间短、分析样品花费低。
    有报道表示，若输血时邻苯二甲酸酯的含量超过50-70mg/kg，则输液者会立即出现呼吸困难，肺原性休克，甚至引起死亡。虽然DEHP的急性毒性较低，但已有报道，动物暴露于DEHP中会导致肝细胞结构及功能变化，同时其与肝细胞癌的发生有关。输液器材及葡萄糖中溶出的DEHP直接进入人体，其危险性应引起足够的重视。